3.有机酸沉积蛋白质: 取1支试管,参加2mL蛋白质溶液,再 参加1mL5%三氯乙酸溶液,振动试管,调查 沉积的生成。 4.有机溶剂沉积蛋白质: 取1支试管,参加2mL蛋白质溶液,再 参加2mL95%乙醇。混匀,调查沉积的生成。
两类。 (1)可逆的沉积反响 此刻蛋白质分子 的结构还没有产生明显改动,除掉引起沉积的 要素后,蛋白质的沉积仍能溶解于本来的溶 剂中,并坚持其天然性质而不变性。如大多 数蛋白质的盐析效果或在低温下用乙醇(或 丙酮)短时间效果于蛋白质。提纯蛋白质时, 常使用此类反响。 (2)不可逆沉积反响 此刻蛋白质分子 内部结构呈现严重改动,蛋白质常变性而沉 淀,不再溶于本来溶剂中。加热引起的蛋白 质沉积与凝结,蛋白质与重金属盐或某些
混匀,调查改动→放置顷刻→各加8mL H2O 2,3号管内加1滴甲基红,再分别用0.1mol/L醋酸和 0.05mol/L碳酸钠中和 调查色彩改动和沉积产 生状况,记载
有机酸的反响都归于此类。 蛋白质变性后,有时因为保持溶液稳 定的条件任旧存在(如电荷),并不分出。 因而变性蛋白质并不必定都表现为沉积, 而沉积的蛋白质也未必都已变性。
1.蛋白质的盐析即中性盐沉积蛋白质: 取1个离心管参加5mL蛋白质溶液和5mL 饱满硫酸铵溶液,混匀后静置10min则球蛋 白沉积分出。2000r/min离心5min,将上清 液转入另一离心管,向沉积中加少数水,
1.加深对蛋白质胶体溶液安稳要素的知道。 2.了解沉积蛋白质的几种办法及其有用含义。 3.了解蛋白质变性与沉积的联系。
在水溶液中的蛋白质分子因为标明产生水 化层和双电层而成为安稳的亲水胶体颗粒,在 必定的理化要素影响下,蛋白质颗粒可因失掉 电荷和脱水而沉积。蛋白质的沉积反响可分为
调查沉积是否溶解,为什么? 向另一离心管的上清液增加硫酸铵粉末, 边加边搅,直至粉末不再溶解到达饱满停止, 此刻分出的沉积为清蛋白。2000r/min离心 5min,倒去上清液,向沉积中加少数水,观 察沉积是否溶解。
2.重金属盐沉积蛋白质: 取1支试管,参加2mL蛋白质溶液,再参加 2滴3%硝酸银溶液,振动试管,调查沉积的生 成.
振摇混匀后,调查各管有何改动。放置 顷刻,向各管内加水4mL,然后在第2,3号 管中各加1滴甲基红,再分别用0.1mol/L醋 酸溶液及0.05mol/L碳酸钠溶液中和之。观 察各管色彩的改动和沉积的生成。每管再加 0.1mol/L盐酸溶液数滴,调查沉积的再溶解。 解说各管产生的悉数现象。